1、用 PBS 浸洗细胞 2 次，然后经 0.125％ 胰蛋白酶消化收集细胞，离心（1 000 r/min，5 min)。
2、吸去上清液，加入 2.5％ 戊二醛，在 4 ℃ 条件下预固定细胞 2 h。如为组织样本，将组织切成 1 mm 3 小块，用同样方法预固定。
3、用 0.1 mol/L 磷酸漂洗液浸洗细胞团或组织块 3 次，每次 15 min。然后，在 50％、70％、90％ 乙醇中逐级脱水，各 15 min。
4、在 4 ℃ 条件下用 90％ 乙醇和 90％ 丙酮混合液（1:1）置换乙醇，再用 90％ 丙酮置换，各 15 min。
5、在室温下用纯丙酮置换 3 次，每次 20 min。
6、用 0.1 mol/L 磷酸漂洗液浸洗 3 次，每次 15 min。
7、用 1％ 锇酸固定 2~3 h。
8、用 0.1 mol/L 磷酸漂洗液漂洗 3 次，每次 15 min。
9、将标本放入纯丙酮和 Jpurr 树脂（2:1）混合液中浸透，室温条件下放置 3 h。然后，在纯丙酮和 Jpurr 树脂（1:2）混合液中过夜。
10、在 37 ℃ 条件下，Jpurr 树脂中放置 2 h。
11、37 ℃ 烘箱中过夜，45 ℃ 烘箱中放置 12 h，最后在 60 ℃ 烘箱中放置 24 h。
12、用超薄切片机作超薄切片，然后用 3％ 醋酸双氧铀和枸橼酸铅双重染色。
13、在透射电镜下观察细胞内的自噬结构。